假(jia)病(bing)(bing)(bing)毒是(shi)指一種(zhong)反(fan)轉錄病(bing)(bing)(bing)毒整合了另外一種(zhong)病(bing)(bing)(bing)毒的(de)囊膜糖蛋白,從而(er)形(xing)成的(de)具有外源性(xing)病(bing)(bing)(bing)毒囊膜,而(er)基(ji)因(yin)(yin)組(zu)仍(reng)保持著反(fan)轉錄病(bing)(bing)(bing)毒本身基(ji)因(yin)(yin)組(zu)特性(xing)的(de)病(bing)(bing)(bing)毒,又稱為假(jia)型病(bing)(bing)(bing)毒。
用帶有(you)一(yi)(yi)種病毒(du)外(wai)(wai)(wai)膜(mo)蛋白(bai)基(ji)(ji)(ji)因的質粒與帶有(you)另(ling)一(yi)(yi)種病毒(du)骨架基(ji)(ji)(ji)因的質粒共轉染到包裝細胞(bao)(bao)(如293T細胞(bao)(bao))中,外(wai)(wai)(wai)膜(mo)蛋白(bai)基(ji)(ji)(ji)因在包裝細胞(bao)(bao)表面表達出外(wai)(wai)(wai)膜(mo)蛋白(bai),另(ling)一(yi)(yi)種病毒(du)的基(ji)(ji)(ji)因在包裝細胞(bao)(bao)中轉錄(lu)翻譯組裝成病毒(du)顆粒,病毒(du)顆粒出芽(ya)時(shi)會被(bei)細胞(bao)(bao)表面表達的外(wai)(wai)(wai)膜(mo)蛋白(bai)所(suo)包裝,即形成假病毒(du)。
目前構建假病毒的體系主要有兩種:一種是基于鼠類白血病病毒(MuLV)等反轉錄病毒載體的假病毒構建體系;另一種是以慢病毒如(HIV-1)為基礎發展起來的假病毒構建體系。以慢病毒載體為基礎的假病毒對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。
與自然源(yuan)性病毒相比,假病毒感染系(xi)統(tong)主要具有以下優勢∶
假病毒(du)核酸分(fen)子上編碼(ma)囊膜蛋白的基(ji)因被修飾掉,因此不(bu)(bu)具備自我(wo)復制能力,只能進行單一(yi)周期的侵染,不(bu)(bu)能再(zai)組裝成(cheng)病毒(du)顆粒(li)。
可引入(ru)的報告基因(yin)主要有分泌型胎盤磷酸酯(zhi)酶(SEAP)、β一(yi)半乳糖苷酶(Lac Z)、β一(yi)葡(pu)萄糖苷酸酶(GUS)、螢火蟲熒(ying)光(guang)素(su)酶(LUC)和綠(lv)色(se)熒(ying)光(guang)蛋白(GFP)等,便于進行(xing)定性(xing)和定量分析(xi)。
在研究致病(bing)性高(gao),并目(mu)不(bu)易體外培養的(de)病(bing)毒(du)(du)(du)時(shi),制備假(jia)病(bing)毒(du)(du)(du)是(shi)一種(zhong)行之(zhi)有(you)效的(de)、安全的(de)、可信的(de)方(fang)法。假(jia)病(bing)毒(du)(du)(du)通(tong)常被用于(yu)病(bing)毒(du)(du)(du)與宿(su)主細胞(bao)間相互(hu)關(guan)系(xi)檢測、受體鑒定、中(zhong)和抗體效價評價及基因治(zhi)療等方(fang)面研究。
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